人Dickkopf1基因腺病毒载体的构建及感染黑色素瘤后β-catenin表达的研究

作者：陈恒君; 李惠; 陈瑾; 卢小娟

来源：第三军医大学学报, 2010, (12): 1286-1289.

• DKK1基因
• 腺病毒科
• 黑色素瘤
• 信号传导
• Wnt蛋白质类 DKK1 genes
• adenovirus
• melanoma
• signal transduction
• Wnt proteins

目的构建高表达外源性Dickkopf1(DKK1)基因的重组腺病毒载体(Ad-DKK1);感染黑色素瘤细胞株后研究Wnt信号通路中主要信号分子β-catenin的表达变化。方法利用PCR技术扩增目的基因DKK1;应用分子克隆技术和AdEasy系统重组腺病毒技术,把目的基因亚克隆到穿梭质粒;经酶切和测序后,在BJAdeasy中同源重组;用PacⅠ酶切过的重组腺病毒DNA在HEK293中包装并扩增;实验分为5组:Ad-DKK1感染组、Ad-SimDKK1感染组、Ad-GFP感染组、Ad-RFP感染组和空白细胞对照组。按照MOI值为80感染恶性黑色素瘤细胞株A375,观察细胞形态;RT-PCR法检测...

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院