2014—2017年河南省副猪嗜血杆菌分离菌株的PCR鉴定及分型

作者：邱静静; 丁轲^*; 余祖华; 贾艳艳; 张春杰; 汪洋; 赵战勤

来源：畜牧兽医学报, 2019, 50(08): 1649-1657.

• 副猪嗜血杆菌
• PCR分型
• 序列分析
• 外膜蛋白

为了解河南省猪场副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis, HPS)病的血清型流行情况,本研究于2014—2017年从河南省不同县市采集813份发病猪的肺、关节液等病料样品进行流行病学调查。首先通过TSA培养基分离病原,然后采用PCR法进行分子鉴定及分型鉴定。选取3个不同血清型分离株作为代表毒株进行外膜蛋白OMP基因的扩增及序列分析。结果显示HPS总分离率为7.75%(63/813),不同年份的分离率为5.49%(13/237)～11.31%(19/168),血清4型、5型、14型、不可分型(NT)的分离率分别为38.10%(24/63)、33.33%(21/63)、7.94%(5/63)、20.63%(13/63),血清4型、5型为优势血清型,其次是14型和不可分型的菌株。三个代表毒株与国内外毒株核苷酸相似性为98.6%～99.9%,氨基酸相似性为99.0%～100.0%。遗传进化树分析表明,Henan-HPS-ZK5和Henan-HPS-KF4、Henan-HPS-LY14分别处于两个分支,其中代表血清4型和14型的毒株Henan-HPS-KF4和Henan-HPS-LY14位于同一亚支,而血清5型的毒株Henan-HPS-ZK5与前两者距离较远。OMP氨基酸序列分析显示,Henan-HPS-ZK5第57位发生了T57(Thr)→A57(Ala)的突变;血清4型、9型和14型HPS第89位、115位、233位和239位氨基酸分别为Gln(Q)、Glu(E)、Arg(R)和Gly(G),而其他血清型均为Arg(R)、Lys(K)、Gly(G)和Arg(R)(未定型菌株除外)。本研究数据在一定程度上反映了河南省HPS病发病情况及血清型流行情况,从而为河南地区HPS病的疫苗研发、控制提供了科学客观的参考依据。

• 单位
  河南科技大学