东方田鼠HSP90α和KPNA2基因表达及体内抗日本血吸虫效果比较观察

作者：成钢^*; 王芊薄; 龚强; 熊德慧

来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2019, 37(05): 552-562.

• 东方田鼠
• HSP90α
• KPNA2
• 日本血吸虫
• 基因表达

目的比较东方田鼠抗日本血吸虫基因HSP90α和KPNA2的表达差异及体内抗虫效果差异。方法RTPCR扩增并比较健康东方田鼠新分离的心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉、皮肤、骨髓组织中HSP90α和KPNA2的表达情况。40只雄性昆明小鼠随机分为空白对照组(DMEM培养基)、阴性对照组(pLXSN质粒转染病毒)、 pLXSNHSP90α组和pLXSNKPNA2组等4组,每组10只,各组分别于第1、 3、 7 d每鼠尾静脉注射重组质粒转染病毒(2×106cfu/ml)或培养基0.2 ml。注射后第2天,各组小鼠腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴(30±2)尾/鼠。感染后第42天,剖杀小鼠,门脉灌注检获成虫,测量死亡后合抱及单性虫体长度,计算虫荷、减虫率、每克肝虫卵数(LEPG)、肝脏减卵率,HE染色观察肝脏病理变化,观察比较HSP90α和KPNA2对日本血吸虫感染小鼠的保护效果。结果 RTPCR结果显示,HSP90α在东方田鼠脑、骨髓中高表达,而KPNA2在心、肾和肌肉中高表达。体内实验结果显示,pLXSNHSP90α组和pLXSNKPNA2组小鼠的肝脏颜色分别呈灰黄色和灰黑色,虫荷分别为(11.3±1.1)、(11.6±1.3)条,血吸虫成虫体长分别为(1.19±0.04)、(1.21±0.05) cm, LEPG分别为1 852.0±392.4、 1 035±485.4,与阴性对照组[(16.7±1.3)条、(1.39±0.06) cm、 3 644.0±523.6]比较差异均有统计学意义(P <0.05)。两个实验组的虫荷、成虫体长差异无统计学意义(P> 0.05),而LEPG指标差异有统计学意义(P <0.05)。两组减虫率分别为40.8%和39.4%(P> 0.05),肝减卵率分别为57.9%和76.5%(P <0.05),与阴性对照组(12.6%、 17.3%)比较差异有统计学意义(P <0.01)。肝组织切片HE染色镜下观察显示,pLXSNHSP90α组和pLXSNKPNA2组小鼠的肝脏虫卵结节数量均远少于阴性对照。结论东方田鼠抗日本血吸虫基因HSP90α和KPNA2在脑、骨髓、心脏、肾脏和肌肉组织中表达存在差异;两者对日本血吸虫感染小鼠保护效果在减卵率和LEPG存在差异。

• 单位
  湖南文理学院; 中南大学