肺炎克雷伯杆菌表达吡咯喹啉醌依赖性聚乙烯醇脱氢酶

作者：弥志伟; 孙忠义; 赵鹏; 田平芳^*

来源：北京化工大学学报(自然科学版), 2019, 46(05): 46-52.

DOI：10.13543/j.bhxbzr.2019.05.007

• 聚乙烯醇脱氢酶
• 肺炎克雷伯杆菌
• 吡咯喹啉醌
• 辅酶再生

聚乙烯醇脱氢酶(PVADH)是降解聚乙烯醇(PVA)的关键酶,大肠杆菌或毕赤酵母生产PVADH需额外添加辅酶吡咯喹啉醌(PQQ)才具活性。为了降低添加PQQ的成本,在PQQ天然生产菌肺炎克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae)中表达全酶PQQ-PVADH。首先通过外源基因密码子优化实现PVADH的高效表达,PVADH酶活达到45 U/mL;进而通过辅酶再生提高PQQ产量,双质粒重组菌Kp(pvadh+pqq)的PVADH酶活达到68 U/mL;最后经发酵优化,PVADH酶活达到81 U/mL,为PQQ-PVADH的生产提供了另一种选择方案。

• 单位
  北京化工大学