生酮饮食对难治性癫痫患儿Th细胞亚群的影响

作者：崔萍萍; 李成荣; 李秋^*; 廖建湘; 王国兵; 林素芳; 陈黎

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2015, 35(03): 225-231.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2015.03.014

• 生酮饮食
• 难治性癫痫
• Th细胞亚群
• 过氧化物酶增殖物激活受体γ
• 氧化应激

目的探讨生酮饮食(ketogenic diet, KD)治疗对难治性癫痫(intractable epilepsy, IP)患儿Th细胞亚群的影响。方法 IP患儿35例, 同年龄健康对照组18例。采用流式细胞术分别检测外周血CD3+CD8-IFN-γ+(Th1)细胞、CD3+CD8-IL-17A+(Th17)细胞及CD4+CD25+Foxp3+(Treg)细胞比例;实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测外周血CD4+CD25-T细胞中T-bet、ROR-γt、IFN-γ、IL-17A、过氧化物酶增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ, PPAR-γ)mRNA及CD4+CD25+T细胞Foxp3、GITR、CTLA-4、PPAR-γ mRNA的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测受试者血浆中前列腺素F2a (prostaglandin F2a, PGF2a)、环氧化酶-2(cyclooxygenases-2, COX-2)蛋白浓度;流式微球阵列技术(CBA)检测受试者血浆IL-17A、IFN-γ蛋白表达水平。结果 (1)IP患儿外周血Treg细胞比例明显低于同年龄健康对照组(P<0.05), KD治疗后, Treg细胞数量明显增加(P<0.05);IP患儿外周血Th1、Th17细胞比例明显高于同年龄健康对照组(P<0.05), KD治疗后显著下降(P<0.05);IP患儿外周血CD4+CD25+Treg细胞转录因子Foxp3及相关因子GITR、CTLA-4基因转录水平明显低于健康对照组(P<0.05), 治疗后明显上调;CD4+CD25-T细胞中T-bet、ROR-γt、IL-17A、IFN-γ等Th1/Th17细胞相关因子表达量显著高于健康对照组(P<0.05), 治疗后明显下降;(2)IP患儿CD4+CD25+及CD4+CD25-细胞PPAR-γ基因表达明显低于对照组(P<0.05), KD治疗后表达量明显上升(P<0.05), 相关性分析发现Treg细胞与PPAR-γ表达呈正相关(r=0.61, P<0.05), Th1及Th17细胞与PPAR-γ表达呈负相关[Th1(r=-0.54, P<0.05);Th17(r=-0.64, P<0.05)];(3)IP患儿IL-17A及IFN-γ血浆浓度明显高于健康对照组(P<0.05), KD治疗后明显下降(P<0.05), COX-2及PGF2a血浆浓度明显高于正常对照组(P<0.05), KD治疗后显著下降(P<0.05), 相关性分析发现COX-2表达与PPAR-γ呈负相关(r=-0.571, P<0.05), PGF2a表达与PPAR-γ亦呈负相关(r=-0.586, P<0.05)。结论 KD可抑制氧化应激反应, 降低COX-2及PGF2a蛋白浓度, 上调PPAR-γ表达, 调节Th细胞亚群紊乱, 减少炎症细胞因子产生, 这可能是KD治疗IP的作用机制之一。

• 单位
  深圳市儿童医院; 重庆医科大学; 重庆医科大学附属儿童医院