科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的：通过数据挖掘和细胞实验探究黄芪总皂苷（AST）通过调控lncRNA MIR22HG(MIR22HG)/Caspase-3对类风湿关节炎（RA）凋亡指标Bax、Caspase-3、Caspase-8和高凝指标PAF、PGI2的作用机制。方法：收集RA患者30例、正常人30例，提取外周血单个核细胞（PBMCs），定量逆转录PCR法（RT-qPCR）检测MIR22HG的表达，使用数据挖掘探索及其与凋亡、凝血指标的相关性。建立RA-FLS细胞系，构建MIR22HG过表达质粒，转染至RA-FLS中，用cell counting kit8(CCK-8)、RT-qPCR、酶联免疫吸附法（ELISA）、蛋白质免疫印迹法（WB）、免疫荧光法（IF）、流式细胞术检测黄芪总皂苷（AST）对RAFLS的凋亡和凝血指标的影响。结果：与正常组相比，RA组MIR22HG高表达，PAF、Bcl-2mRNA升高，PGI2、Bax mRNA降低（P<0.05）。Spearman相关性分析结果显示，MIR22HG与PAF、Bcl-2呈正相关，MIR22HG与PGI2、Bax呈负相关（P<0.05）。关联规则结果显示，MIR22HG表达升高与Bax、PGI2降低和PAF、Bcl-2升高的支持度>45%、置信度均>95%、提升度均>1。CCK-8结果显示，AST对RA-FLS最佳干预浓度和时间分别为2 mg·mL-1和48 h。经AST处理后，RA-FLS中MIR22HG、Bcl-2蛋白表达降低，Bax、Caspase-3和Caspase-8蛋白表达升高，细胞凋亡增多，PAF降低、PGI2升高（均P<0.05）。过表达MIR22HG，以上结果可逆。使用Caspase-3信号通路激动剂PETCM处理RA-FLS，效果和AST一致。结论：AST可以通过抑制MIR22HG、协同Caspase-3信号通路起到促进RA-FLS凋亡、抑制RA-FLS高凝状态的作用。
- 单位
