犬瘟热病毒弱毒和野毒的全基因组扩增及序列测定

作者：薛向红; 卜研; 赵建军; 史宁; 胡博; 朱言柱; 廉士珍; 张蕾; 白雪; 闫喜军^*

来源：中国兽医学报, 2019, 39(09): 1710-1714.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.09.09

• 通用引物
• 犬瘟热病毒
• 全基因组扩增
• 序列测定

分析比对了GenBank中已公布的23株犬瘟热病毒全基因组序列,针对保守区设计了11对特异性通用引物,用于扩增犬瘟热病毒野毒株和疫苗株全基因组。通过优化11对引物的工作浓度及退火温度等条件,对保存的3株疫苗毒CDV3株、OR12株、CDV/R-20/8株和2株野毒HBF-1株和SD(14)07株进行了全基因组扩增。取5μL扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳,结果显示11对通用引物对以上5株犬瘟热病毒扩增后,均获得11个特异性目的片段,条带大小与预期相符。选取疫苗毒OR12株和野毒HBF-1株的进行全基因组序列测定,与GenBank中已公布的序列进行比对,同源性均大于99.0%,证实这11对特异性通用引物能够实现对犬瘟热病毒野毒和弱毒全基因组的准确扩增,并获得准确的全基因组序列。

• 单位
  中国农业科学院特产研究所