骨髓间充质干细胞外泌体介导miR-124-1对小胶质细胞M2型极化调控的影响

作者：郝磊; 金戈; 杨涌涛; 王军伟; 孙洋; 秦翠玲; 展群岭^*

来源：上海交通大学学报 (医学版), 2022, 42(03): 323-330.

• 骨髓间充质干细胞
• 外泌体
• miR-124-1基因
• HAPI细胞
• M2型极化

目的·探讨过表达miR-124-1基因的骨髓间充质干细胞（bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMMSCs外泌体（exosomes,Exo）对小胶质细胞（microglia,MG） M2型极化调控的影响。方法·分离、培养鼠BMMSCs，提取其Exo (BMMSCs-Exo)，并分别对BMMSCs及BMMSCs-Exo行流式细胞术、透射电子显微镜（transmission electron microscope,TEM）与蛋白质印迹（Western blotting）检测及鉴定。合成miR-124-1基因，构建其慢病毒载体，观测过表达miR-124-1基因的BMMSCs及其Exo的miR-124-1基因的表达变化。将过表达miR-124-1基因的BMMSCs-Exo (BMMSCsExo+miR-124-1,Exo/124-1)与经脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）活化的HAPI小胶质细胞株（HAPI细胞）共培养。分别收集Exo组与Exo/124-1组细胞。用仅含LPS培养基培养的HAPI细胞（LPS组）与未处理的HAPI细胞（正常组）作对照。使用实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR,q PCR)和Western blotting分别检测其M1型分子[白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）]和M2型分子（CD206、IL-10）的m RNA及其蛋白的表达变化。结果·成功分离、培养、鉴定了BMMSCs及BMMSCs-Exo。Exo/124-1明显表达miR-124-1基因。q PCR和Western blotting检测证实，BMMSCs-Exo能携带miR-124-1基因，其明显下调了HAPI细胞的IL-6 （与正常组和LPS组比较，在基因水平分别下调了55.71%、73.04%，在蛋白水平分别为52.32%、76.95%）和TNF-α（与正常组和LPS组比较，在基因水平分别下调了51.95%、68.91%，在蛋白水平分别为52.14%、77.47%）。并且Exo/124-1上调了HAPI细胞的CD206（与正常组和LPS组比较，在基因水平分别上调了46.90%、76.99%，在蛋白水平分别为65.13%、85.11%）和IL-10 （与正常组和LPS组比较，在基因水平分别上调了43.09%、72.36%，在蛋白水平分别为55.19%、78.18%）的表达。结论·BMMSCs-Exo可介导miR-124-1调控HAPI细胞向M2型极化。

• 单位
  重庆市第五人民医院; 神经内科