改良Langendorff主动脉逆行灌流法分离不同大鼠心肌细胞的效率探讨

作者：马全萍; 李小龙; 燕茹; 杨震^*

来源：宁夏医学杂志, 2023, 45(07): 642-645.

DOI：10.13621/j.1001-5949.2023.07.0642

• Langendorff主动脉逆行灌流法
• 心肌细胞
• 急性分离

目的 比较分析Langendorff主动脉逆行灌流联合酶消化传统4步法和改良2步法急性分离普通远交群大鼠(SD)心肌细胞的优缺点。同时探讨改良2步法分离普通SD大鼠、自发性高血压大鼠(SHR)及wistar-京都大鼠(WKY)心肌细胞数量和质量的差异。方法 同时运用传统4步法和改良2步法急性分离SD大鼠心肌细胞，在倒置显微镜下观察心肌细胞形态及存活细胞比率。随后用改良2步法分离SD、WKY和SHR的心肌细胞，比较三种大鼠心肌细胞数量和质量差异，探讨改良2步法在不同大鼠心肌细胞急性分离的价值。结果 两种方法分离SD大鼠心肌所得杆状细胞横纹清晰、棱角分明，均为可供膜片钳实验顺利进行的存活细胞，改良2步法分离所得杆状细胞数、总细胞数较传统4步法显著增加，差异有统计学意义(P<0.05);改良2步法分离3组大鼠杆状细胞数、总细胞数差异有统计学意义(P<0.05),3组大鼠杆状细胞比率、覆钙后杆状细胞数和细胞总数均没有差异(P>0.05);3组大鼠心脏重量、消化时间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 心肌细胞急性分离的Langendorff主动脉逆行灌流联合酶消化改良2步法分离SD大鼠心肌杆状细胞比率和质量较传统4步法没有区别；此改良2步法对分离SHR与WKY大鼠心肌细胞同样适用，改良2步法经济高效，值得在不同大鼠间推广。

• 单位
  宁夏医科大学总医院; 海原县人民医院