ROR1-AS1调控Notch1信号通路对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡影响

作者：韩拓; 肖栋; 陈亮; 张伟^*

来源：肿瘤学杂志, 2022, 28(01): 40-45.

• MCF-7
• RNA
• ROR1-AS1
• Notch1
• 乳腺癌细胞
• 细胞增殖和凋亡
• 信号通路

[目的]研究酪氨酸蛋白激酶跨膜受体1反义RNA 1(tyrosine protein kinase transmembrane receptor 1 antisense RNA 1,ROR1-AS1)调控Notch1信号通路对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。[方法]实时荧光定量PCR方法检测乳腺癌MCF-7、MDAMB-231、MDA-MB-361细胞和正常乳腺上皮MCF10A细胞中ROR1-AS1表达变化。乳腺癌MCF-7细胞分成对照、sh-NC(转染shRNA对照)、sh-ROR1-AS1(转染ROR1-AS1 shRNA)、sh-ROR1-AS1+Jagged1组(转染ROR1-AS1 shRNA,Notch1通路激活剂Jagged1处理)。CCK-8实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭,Western blot方法检测细胞中活化的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶9(cleaved cysteinyl aspartate-specific protease-9,C-Caspase-9)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、活化的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3(cleaved cysteinyl aspartate-specific protease-3,C-Caspase-3)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、Notch1、Hes1蛋白表达。[结果]乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-361细胞中ROR1-AS1水平明显高于正常乳腺上皮MCF10A细胞(P<0.05)。与对照组、sh-NC组比较,sh-ROR1-AS1组乳腺癌MCF-7细胞存活率降低(100.00%±9.82%,99.74%±12.05%,58.91%±6.33%),细胞凋亡率升高(4.81%±0.26%,4.93%±0.34%,20.58%±2.11%),细胞迁移数目(225.36±12.84个,224.89±19.56个,140.89±13.64个)和侵袭数目(180.47±16.32个,177.54±16.92个,110.44±10.87个)减少,细胞中C-Caspase-9、E-cadherin、C-Caspase-3蛋白表达水平增加,N-cadherin、Notch1、Hes1蛋白表达水平降低(P<0.05)。与sh-ROR1-AS1组比较,shROR1-AS1+Jagged1组乳腺癌MCF-7细胞存活率升高(100.00%±11.58%vs 147.36%±12.05%),细胞凋亡率降低(19.54%±1.74%vs 8.36%±0.75%),细胞迁移数目(139.58±12.78个vs 175.26±16.94个)和侵袭数目(107.45±9.35个vs 162.04±13.67个)均升高,C-Caspase-9、E-cadherin、C-Caspase-3蛋白水平降低,N-cadherin、Notch1、Hes1蛋白水平升高(P<0.05)。[结论]下调ROR1-AS1通过抑制Notch1信号减弱乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭和EMT能力,激活细胞凋亡。

• 单位
  西安交通大学