南蛇藤多萜通过抑制Chk1介导胃癌细胞DNA损伤并诱导其凋亡

作者：姜壮壮; 游越; 赵阳; 陶丽; 刘延庆^*

来源：中国药理学通报, 2021, 37(03): 417-423.

• 南蛇藤多萜
• 胃癌细胞
• Chk1
• DNA双链断裂
• DNA损伤应答
• 细胞凋亡

目的从DNA损伤应答角度探讨南蛇藤多萜(the total terpenoids of Celastrus orbiculatus Thunb.,TTC)对胃癌细胞的抑制作用。方法 CCK-8实验考察不同浓度(0、20、40、80、160、320 mg·L-1)的南蛇藤多萜对胃癌细胞的毒性影响;克隆形成率实验检测TTC对胃癌细胞的克隆形成的影响;彗星实验分析南蛇藤多萜对胃癌细胞DNA的影响;Western blot实验检测DNA损伤相关蛋白γH2AX、Poly-PAR、p-Chk1以及cleaved-PARP1的影响。结果 TTC在24 h,48 h,72 h对AGS和MKN-45细胞的IC50分别是421.1、99.68、58.57 mg·L-1和308.2、124.1、68.21 mg·L-1;克隆形成实验表明5、10 mg·L-1的TTC对AGS和MKN-45细胞的克隆形成抑制率分别为29.67%、61.46%和42.73%、64.39%;TTC能够加重胃癌细胞DNA损伤而同等剂量对正常胃粘膜上皮细胞GES-1细胞DNA几乎无损伤;TTC能够增加DNA单双链断裂Poly-PAR、γH2AX蛋白的表达;抑制Chk1的磷酸化水平表达,并增加cleaved-PARP1的蛋白表达。结论 TTC能够抑制DNA损伤应答激酶Chk1的激活,从而诱导胃癌细胞DNA单双链断裂加剧最终诱导细胞凋亡。

• 单位
  扬州大学