摘要
目的 探讨解毒消癥饮(JXY)对人淋巴管内皮细胞(HLEC)体外淋巴管生成能力的影响。方法 MTT和Western blot法检测各浓度JXY对人肝癌细胞HepG2细胞活力和血管内皮生长因子C(VEGF-C)表达的影响。将HLEC细胞分为对照组、VEGF-C组、JXY低剂量组(简称低剂量组)、JXY中剂量组(简称中剂量组)、JXY高剂量组(简称高剂量组)。对照组每孔加入100μL ECM完全培养基,VEGF-C组予外源性因子VEGF-C干预,低、中、高剂量组分别予VEGF-C联合不同浓度JXY(0.05、0.1、0.2 mg/mL)进行干预,每组均干预24 h。采用MTT法检测各组细胞活力,Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡情况,划痕和迁移实验检测细胞损伤修复和迁移能力,管腔形成实验检测体外淋巴管生成,Western blot法检测血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和MMP-2蛋白表达。结果 JXY可显著抑制肝癌细胞的活力和VEGF-C蛋白的表达(P<0.01),抑制HLEC细胞体外增殖(P<0.01),促进细胞凋亡,抑制划痕损伤修复、细胞迁移及淋巴管腔的体外生成(P<0.01),下调了淋巴管生成相关蛋白VEGFR-3、MMP-9、MMP-2的表达(P<0.01)。结论 JXY显著抑制肿瘤细胞分泌的VEGF-C进而抑制HLEC的体外淋巴管生成,其作用机制可能与下调肿瘤微环境中的VEGFR-3、MMP-9和MMP-2的表达相关。
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