SARS-CoV-2收获液滴度稳定性及灭活动力学分析

作者：郭冰峰; 韩斌; 郝一楠; 王魁; 殷吉祥; 李岩; 李楠; 凌相平; 潘若文^*

来源：中国生物制品学杂志, 2023, 36(02): 129-144.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003809

• 严重急性呼吸综合征冠状病毒2
• 病毒滴度
• 灭活动力学
• 灭活验证

目的 对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)收获液在2～8℃环境下的滴度稳定性及β-丙内酯灭活剂对病毒的灭活效果进行研究。方法 将3批(批号：202111001、202111002和202111003)SARS-CoV-2收获液于2～8℃放置12 d，每隔3 d(0、3、6、9、12 d)取样，采用Karber法检测病毒滴度；2～8℃过夜平衡的3批病毒收获液按1∶4 000的体积分数加入β-丙内酯进行灭活，在不同的灭活时间点(0、0.5、1、1.5、2、3、4、8、16、24 h)取样检测病毒滴度，取灭活8.0、16、24 h的病毒液进行灭活验证，取灭活24 h的病毒灭活液进行透射电镜观察。结果 2～8℃环境下，SARS-CoV-2的滴度随放置时间的延长不断降低，0～3 d滴度下降不明显，第12天滴度由最初的7.75、6和7.5 lgCCID50/mL降至5.75、4.625和6.25 lgCCID50/mL，表明2～8℃环境下病毒活力呈逐渐降低的趋势；随着灭活时间的增加，病毒滴度不断降低，灭活3 h后，病毒滴度已无法检出。透射电镜观察显示，灭活后的病毒颗粒完整，刺突蛋白分布均匀。结论 2～8℃环境下保存的SARS-CoV-2毒力不稳定，应尽快进行后续的灭活纯化工艺；病毒灭活3 h后滴度已无法检出，可为灭活工艺的确定提供参考。