条件性胰岛β细胞DEPTOR基因敲除小鼠构建及鉴定

作者：赖舒畅; 邱鸿; 王肖; 潘道延; 王桢钰; 李凯; 白晓春; 沈洁

来源：实用医学杂志, 2018, 34(04): 552-555.

DOI：10.3969/j.issn.1006-5725.2018.04.008

• DEPTOR
• Cre/loxp系统
• 胰岛β细胞

目的构建并鉴定条件性胰岛β细胞DEPTOR基因敲除小鼠,为研究DEPTOR基因在糖尿病发生机制的研究提供动物模型。方法将引进的条件性胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶小鼠与DEPTORloxp/loxp小鼠进行杂交繁殖,并对子代进行基因型鉴定,获得基因型为DEPTORloxp/-Cre+/-的小鼠;再让DEPTORloxp/-Cre+/-的小鼠与DEPTORloxp/loxp小鼠杂交获得DEPTORloxp/loxpCre+/-小鼠;基因型为DEPTORloxp/loxpCre+/-的小鼠即为本实验所需要构建模型小鼠。3周龄时通过PCR法鉴定小鼠的基因型;8周龄时腹腔注射他莫昔芬诱导Cre重组酶表达后,免疫荧光验证DEPTOR基因敲除效果。结果从引进这两种小鼠开始繁殖10个月,共获得基因型为DEPTORloxp/loxpCre+/-的小鼠10只,PCR结果证实小鼠的基因型符合DEPTORloxp/loxpCre+/-。免疫荧光结果提示敲除效果明显。结论利用Cre/loxp系统,本研究成功构建并鉴定了条件性胰岛β细胞DEPTOR基因敲除小鼠,为在动物水平研究DEPTOR基因在糖尿病发病机制中的作用提供研究平台。

• 单位
  南方医科大学第三附属医院; 广州中医药大学