shRNA-FAM38A基因对肺癌A549细胞系增殖、迁移和凋亡的影响

作者：马传胜; 周传江; 段超; 何柯

来源：临床肺科杂志, 2019, 24(03): 495-502.

• FAM-38A
• 肺癌细胞
• 增殖
• 迁移
• 凋亡

目的构建shRNA-FAM38A慢病毒载体,对肺腺癌A549细胞中FAM38A基因表达进行沉默干扰,研究其对肿瘤细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法采用慢病毒载体构建的方法,构建shRNA-FAM38A慢病毒载体,免疫组织化学染色检测FAM-38A的表达; RT-qPCR用来检测凋亡因子Bcl-2,Caspase-3和Caspase-9的表达量; CCK-8试剂盒检测肺癌细胞的增殖; Transwell小室检测肺癌细胞的迁移; AV-PI凋亡试剂盒检测肺癌细胞的凋亡。结果 (1)慢病毒转染效率较高,以肺癌细胞A549为靶点种子细胞,慢病毒转染率为90%。这说明慢病毒转染细胞具有较高的转染效率。(2)免疫组织化学方法检测到FAM-38A可以在肺癌组织中过度表达;(3)阴性对照组(shRNAFAM38A-Con),空质粒组,shRNAFAM38A1组和shRNAFAM38A 2组的FAM38A,凋亡因子Bcl-2,Caspase-3和Caspase-9的mRNA的相对表达量具有统计学差异(F=17. 967; P <0. 05)。shRNA FAM-38A1组中FAM38A,凋亡因子Bcl-2,Caspase-3和Caspase-9的mRNA的相对表达量与shRNAFAM38A 2组相比,表达量降低,表明shRNA FAM-38A1可以有效抑制FAM38A的表达,抑制Bcl-2的表达,促进Caspase-3和Caspase-9的表达,进而促进肿瘤细胞凋亡。然而shRNA FAM-38A2是个无效干扰序列,没有起到沉默FAM38A基因表达的作用。(4) Transwell实验,CCK-8实验和AV-PI实验的结果显示,shR-NA FAM-38A1可以抑制肺癌肿瘤细胞的增殖,抑制肿瘤细胞的迁移,并且可以促进肿瘤细胞的过度凋亡。结论 shRNA FAM38A1可以有效的抑制肺癌细胞的迁移和增殖,并且提高其凋亡率。

• 单位
  本溪市中心医院