白藜芦醇对H2O2处理的佐剂性关节炎大鼠软骨细胞增生的影响及与自噬的关系

作者：季丹; 黄大可; 周瑾; 潘献柱; 祝捷^*

来源：中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志, 2020, 13(03): 236-242.

• 白藜芦醇
• 佐剂性关节炎
• 软骨细胞
• 氧化应激
• 自噬

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对H2O2处理的佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA大鼠软骨细胞增生的影响及其与自噬的关系。方法采取弗氏完全佐剂注射SD大鼠左侧足趾皮下制作AA动物模型。第15天时,动物处死,取股动脉血,检测AA大鼠氧化应激状态。酶消化法体外培养和鉴定AA大鼠原代软骨细胞,给予低浓度H2O2(5μmol/L)处理原代软骨细胞,模拟体内氧化应激状态。给予不同浓度Res处理,MTT法检测软骨细胞增生活性,激光共聚焦检测软骨细胞中自噬相关基因5 (Atg5)的表达,Western blot法检测软骨细胞中p62、Beclin-1自噬相关蛋白的表达。结果组织染色结果显示:AA大鼠踝关节滑膜组织增生,滑膜中炎细胞明显浸润,软骨膜的连续性被破坏,排列紊乱。AA模型中血清丙二醛含量(11.65±1.06)μmol/L增加,谷胱甘肽过氧化物酶含量(140.18±8.65)μmol/L、超氧化物歧化酶活性(133.72±8.36) U/m L均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞组织化学染色示原代软骨细胞胞质Ⅱ型胶原表达阳性。不同浓度Res (1、3、5、10、20、40、80、160 mg/L)可抑制H2O2处理的软骨细胞增生,抑制率分别为(2.2±0.4)%、(5.3±0.6)%、(12.1±1.3)%、(26.6±2.4)%、(40.3±3.1)%、(52.7±4.2)%、(69.2±4.5)%、(72.5±5.1)%,呈剂量依赖性(P<0.05);半数致死量值为37.2 mg/L。软骨细胞质中Atg5绿色荧光呈剂量依赖性增加;软骨细胞中p62蛋白表达呈剂量依赖性降低,Beclin-1蛋白表达呈剂量依赖性升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Res可抑制氧化应激状态下AA大鼠软骨细胞增生,其作用机制可能与Res诱导的软骨细胞自噬改变有关。

• 单位
  安徽省立医院; 中国科学技术大学; 基础医学院; 安徽医科大学; 安徽医学高等专科学校