鸭腺病毒3型MGB TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立

作者：陈翠腾; 陈珍; 朱春华; 蔡国漳; 刘斌琼; 黄瑜^*

来源：农业生物技术学报, 2019, 27(03): 564-570.

• 鸭腺病毒3型(DAdV-3)
• 22K基因
• MGB Taq Man探针
• 实时荧光定量PCR

鸭(Anas platyrhynchos domestica)腺病毒3型(Duck adenovirus type 3, DAdV-3)是近年来我国新发现的鸭源腺病毒。本研究根据NCBI数据库中DAdV-3代表株(CH-GD-12-2014株, GenBank No. KR135164)的22K基因特征,设计特异性引物和探针,建立检测DAdV-3的MGB TaqMan探针qRT-PCR方法。结果表明,建立的qRT-PCR方法具有如下特性:灵敏度高,最低检测限为55拷贝/μL;特异性强,和鸭群常见传染病病原均无交叉反应;重复性好,组内和组间重复实验变异系数分别为0.44%～2.10%和0.64%～2.37%。利用建立的qRT-PCR方法对临床送检的61份鸭源病料进行检测,检出DAdV-3阳性15份,阳性率为24.6%。本研究为后续开展DAdV-3感染的实验室快速诊断和流行病学调查奠定了初步基础。

• 单位
  福建省农业科学院