帕比司他逆转前列腺癌细胞hepaCAM基因表达机制研究

作者：陈娥; 欧俐苹; 唐敏; 刘南京; 吴小候; 罗春丽

来源：中国生物工程杂志, 2016, 36(06): 9-17.

DOI：10.13523/j.cb.20160602

• 前列腺癌
• 肝细胞粘附分子
• 细胞生长

目的:研究帕比司他(Panobinostat)逆转抑癌基因肝细胞粘附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,hepa CAM)表达,协同hepa CAM抑制前列腺癌(prostate cancer,PCa)细胞生长。方法:不同浓度帕比司他作用于体外培养的PC3细胞,首先采用MTT法检测帕比司他对细胞增殖的影响,RT-PCR和Western blot法检测hepa CAM、组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)以及乙酰化组蛋白H3赖氨酸9(Ac-H3K9)的表达变化。接着用不同因素处理细胞,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期改变,RT-PCR和Western blot法检测细胞周期调节因子cyclin D1和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的基因表达。结果:帕比司他抑制PC3细胞生长与作用浓度增加和作用时间呈正相关,hepa CAM mRNA、蛋白以及细胞核中Ac-H3K9表达随帕比司他浓度升高而增高,HDAC1、HDAC3、HDAC4 mRNA和蛋白的表达随浓度升高而降低;单独过表达hepa CAM腺病毒和单独使用帕比司他组PC3细胞生长明显受到抑制且随作用时间延长抑制率增加,两者联用更为明显,差异有统计学意义(P<0.05);与单独hepa CAM腺病毒组和帕比司他组相比,两者联用S期细胞比例明显增高,差异有统计学意义(P<0.05),且可进一步下调cyclin D1、PCNA mRNA和蛋白的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:帕比司他可通过抑制HDACs活性,加强PCa PC3细胞组蛋白H3 N-端的赖氨酸残基乙酰化,逆转hepa CAM表达;hepa CAM腺病毒和帕比司他联用可通过阻滞细胞周期于S期协同抑制PC3细胞生长,作用机制可能与下调cyclin D1和PCNA的表达有关。这对揭示抑癌基因hepa CAM在肿瘤缺失的原因及为将帕比司他应用于临床治疗肿瘤提供了科学支持。

• 单位
  重庆医科大学; 重庆医科大学附属第一医院