巴什拜羊miR-486多态性及其表达规律研究

作者：张伟; 王世银^*; 石国庆^*; 邓双义; 刘晓娜; 杨力伟

来源：农业生物技术学报, 2020, 28(01): 92-100.

• 巴什拜羊
• miR-486
• 突变
• 骨骼肌
• 卫星细胞

miR-486在动物肌肉组织中高表达,在成肌细胞的生长发育中发挥着关键作用。为了阐明miR-486在巴什拜羊(Ovis aries)中的多态性及其表达规律,本研究采用stem-loop qRT-PCR对巴什拜羊胎儿期100 d不同组织,以及胎儿期和出生后共计8个不同发育阶段骨骼肌中miR-486的表达情况进行了定量分析;采用PCR-单链构象多态性(PCR-single strand conformation polymorphism, PCR-SSCP)技术检测了巴什拜羊群体中miR-486前体(precursor miR-486, pre-miR-486)序列的突变情况,并在细胞水平研究了突变对pre-miR-486序列加工成熟的影响。结果表明,miR-486在巴什拜羊100 d胎儿心肌和骨骼肌组织中高表达,在胃、肠组织中度表达,而在肝、脾、肺、肾、皮肤和脑组织中表达量相对较低;miR-486在胎儿期40～100 d的骨骼肌中表达量持续上升,到胎儿期100 d时达到峰值,然后逐渐下降,至胎儿期120 d时达到最低值,而后又逐渐上升直至出生后90 d;在巴什拜羊群体中发现pre-miR-486序列存在1处G>C突变,位于miR-486成熟序列上游第1个碱基处,在100只巴什拜羊中分别检测到GG、GC和CC 3种基因型,但91%的个体为GC基因型,进一步研究结果表明,在骨骼肌卫星细胞中突变型的CC基因型可显著提高细胞中miR-486的表达水平(P<0.05)。本研究可为进一步阐明miR-486对巴什拜羊骨骼肌发育的调控机制及其与巴什拜羊优良肉质性状的关联性提供基础资料。

• 单位
  新疆农垦科学院畜牧兽医研究所; 新疆农业职业技术学院