摘要
目的通过观察温和灸干预治疗后神经根型颈椎病模型大鼠内质网应激(ERS)介导的神经细胞自噬与凋亡因子表达的变化,探讨温和灸治疗神经根型颈椎病的疗效机制。方法 (1)采用SPF级SD大鼠40只,依据随机数字表法平均分为:空白组、模型组、温和灸组、温和灸+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3MA)组每组各10只。(2)通过颈部神经根腋下鱼线卡压法构建CSR大鼠模型,采用大鼠步态障碍行为学评分进行模型评价。(3)造模成功后第3天,温和灸组取大椎穴进行温和灸干预,10 min/次,干预前予腹腔注射1 mL生理盐水;温和灸+3MA组干预方式同温和灸组,干预前予腹腔注射1 mL 3MA;模型组仅予腹腔注射1 mL生理盐水,不做温和灸干预,连续干预7天后处死,空白组正常饲养,不予任何处理,处死时间同其他3组。(4)干预前后采用YLS-3E型痛分析仪测量各组大鼠的机械性痛阈,干预结束后采用Western Blot检测Caspase-12、CHOP、GRP78的表达水平,电镜观察脊髓及神经根自噬小体及细胞超微结构。结果 (1)造模后干预前,与空白组比较,模型组、温和灸组、温和灸+3MA组大鼠出现步态障碍,行为学评分升高(P <0.05),痛阈下降(P <0.05)。干预后,与模型组比较,温和组、温和灸+3MA组痛阈明显上升(P <0.05),步态障碍改善,且温和灸组改善更为明显(P <0.05)。(2)干预后,与模型组比较,温和灸组Caspase-12、CHOP、GRP78蛋白表达均显著下降(P <0.05),温和灸+3MA组GRP78蛋白表达显著下降(P <0.05),Caspase-12、CHOP蛋白表达有所下降,但差异不具有显著性(P> 0.05);与温和灸+3MA组比较,温和灸组CHOP蛋白表达下降明显(P <0.05),Caspase-12、GRP78蛋白表达有所下降,但差异不具有显著性(P> 0.05);电镜观察温和灸组自噬小体增多,且细胞超微结构较为完整。结论温和灸治疗CSR具有良好的镇痛作用,其镇痛机制可能与激活神经细胞自噬,缓解内质网应激水平,抑制内质网应激凋亡因子表达有关。
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单位广西中医药大学; 广西中医药大学第一附属医院