摘要

目的探讨miR-22-3p对IL-1β诱导软骨细胞损伤的影响及其作用机制。方法分离培养大鼠软骨细胞,IL-1β处理细胞48 h构建细胞损伤模型。qRT-PCR与Western blot检测Con组、IL-1β组、IL-1β+miR-NC组、IL-1β+miR-22-3p组、IL-1β+si-NC组、IL-1β+si-TRIM8组、IL-1β+miR-22-3p+pcDNA组、IL-1β+miR-22-3p+pcDNA-TRIM8组细胞中miR-22-3p、TRIM8的表达水平;ELISA检测各组细胞IL-6、IFN-γ、TNF-α的水平;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验验证miR-22-3p与TRIM8的靶向调控作用;Western blot检测各组Bcl-2、Bax的表达量。结果与对照组比较,IL-1β组细胞中miR-22-3p的表达水平、Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05),凋亡率显著升高(P<0.05),TRIM8、Bax的表达水平与IL-6、IFN-γ、TNF-α的水平显著升高(P<0.05);转染miR-22-3p mimics或转染si-TRIM8可明显降低IL-6、IFN-γ、TNF-α的水平与细胞凋亡率及Bax蛋白水平(P<0.05),增加Bcl-2蛋白水平(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-22-3p可靶向结合TRIM8;共转染miR-22-3p mimics与pcDNA-TRIM8可明显降低转染miR-22-3p mimics对细胞凋亡及炎症反应的抑制作用。结论 miR-22-3p可靶向抑制TRIM8表达从而减轻IL-1β诱导的软骨细胞炎症损伤及抑制细胞凋亡。

  • 单位
    青岛市海慈医疗集团