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摘要
目的 探讨环状RNA凌乱样激酶1(circTLK1)在心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中的作用和潜在机制。方法 48只C57BL/6小鼠分为假手术组(Sham组)、MIRI组、sh-NC组、sh-circTLK1组、sh-circTLK1+antagomir-NC组、sh-circTLK1+antagomir-miR-26a-5p组，每组8只；采用结扎左冠状动脉前降支(LAD)建立MIRI小鼠模型。超声心动图检测小鼠左心室射血分数(EF)、左心室缩短分数(FS)、左心室舒张末期内径(LVEDD)和收缩末期内径(LVESD)以评估心脏功能，ELISA检测血清乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平，苏木精-伊红(HE)染色检测心肌组织病理学变化，TUNEL染色检测心肌细胞凋亡，实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测心肌组织中circTLK1、miR-26a-5p、YES1 mRNA和蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验、RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)验证circTLK1/YES1和miR-26a-5p之间的相互作用。结果 与Sham组相比，MIRI组小鼠EF、FS、心肌组织miR-26a-5p水平显著降低，LVEDD、LVESD、血清LDH、CK-MB活性和cTnI水平、心肌细胞凋亡率、心肌组织circTLK1、YES1 mRNA和蛋白水平显著升高(均P<0.05),心肌细胞排列紊乱，细胞间质有炎性细胞浸润；circTLK1敲低可显著上调miR-26a-5p,抑制YES1表达，改善上述指标变化(均P<0.05),减轻心肌损伤；抑制miR-26a-5p可通过上调YES1,显著减弱circTLK1敲低对MIRI的保护作用。双荧光素酶报告基因实验和RIP证实了circTLK1和miR-26a-5p之间的直接相互作用，YES1是miR-26a-5p的靶标。结论 敲低circTLK1可能通过调节miR-26a-5p/YES1轴在MIRI中发挥保护作用，circTLK1可能是MIRI的潜在治疗靶点。
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