雷帕霉素通过AKT/mTOR途径抑制川崎病冠状动脉内皮细胞炎症因子的表达

作者：李洁滢; 胡琳; 杨艳娟; 周忠; 田正; 焦蓉^*

来源：中国病理生理杂志, 2022, 38(08): 1376-1383.

• 雷帕霉素
• 川崎病
• 冠状动脉内皮细胞
• 自噬
• 炎症

目的：探究雷帕霉素对川崎病（Kawasaki disease,KD）冠状动脉损害的抗炎作用及其分子机制。方法：体外培养人冠状动脉内皮细胞（human coronary artery endothelial cells,HCAEC），利用肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激HCAEC 4 h以模拟KD的局部炎性病变，建立KD的细胞模型。整个实验分组为：对照组、TNF-α刺激组和TNF-α+雷帕霉素（50和100 nmol/L）组，雷帕霉素均于TNF-α刺激前24 h加入。通过RT-qPCR和Western blot检测各组炎症因子和自噬相关因子的mRNA及蛋白表达水平，并检测蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）信号通路和核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的活化状态；单丹磺酰尸胺染色后用倒置荧光显微镜观察各组自噬泡的染色情况。结果：HCAEC经TNF-α刺激后炎症因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β和IL-8的mRNA和蛋白表达水平均显著升高（P<0.01），自噬相关蛋白beclin-1表达水平和LC3-II/LC3-I比值显著下降（P<0.05）,p62表达水平显著上升（P<0.05），同时磷酸化的AKT、mTOR(P<0.01)及NF-κB(P<0.05)蛋白水平显著上升。经雷帕霉素处理后AKT/mTOR(P<0.01)及NF-κB(P<0.05)信号通路被抑制，自噬水平激活（P<0.05），各炎症因子的表达水平显著下降（P<0.01）。结论：雷帕霉素可能通过AKT/mTOR信号通路调节自噬水平，并抑制NF-κB信号转导通路，从而降低KD冠状动脉内皮细胞炎症因子的表达。

• 单位
  湖北医药学院; 襄阳市第一人民医院