TRPV4影响软骨细胞退变的初步研究

作者：沈雪; 张琥; 陈德塔; 曹月龙^*

来源：中国骨伤, 2023, 36(10): 990-995.

• 膝骨关节炎
• 软骨退变
• TRPV4

目的:探讨并验证瞬时受体电位香草素受体4(transient receptor potential vanilloid 4,TRPV4)影响软骨细胞的退变。方法:取新生SD大鼠软骨细胞,甲苯胺蓝染色和阿利新蓝染色鉴定;通过白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)构建体外软骨细胞炎症模型,采用TRPV4抑制剂处理炎症条件下软骨细胞,经荧光定量PCR(real-time PCR,PCR)法检测软骨细胞中TRPV4、基质金属肽酶-13 (matrix metallopeptidase 13,MMP-13)、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶-5(A aisintegrin and metalloproteinase with thrombospondin 5,ADAMTS-5)、一氧化氮合酶2(nitric oxide synthase2,NOS2)、Ⅱ型胶原α1 (collagen,typeⅡ,alpha 1,Col2α1)和软骨蛋白聚糖(aggrecan,Acan)mRNA;通过TRPV4不同浓度过表达质粒处理原代软骨细胞,筛选最佳过表达剂量,并经RT-PCR法检测最佳TRPV4过表达剂量下软骨细胞中TRPV4、MMP-13、ADAMTS-5、NOS2、Col2α1、Acan mRNA表达情况。结果:甲苯胺蓝染色和阿利新蓝染色鉴定提取细胞为原代软骨细胞。RT-PCR显示,经TRPV4抑制剂处理后炎症条件下软骨细胞中TRPV4、MMP-13、ADAMTS-5、NOS2 mRNA的表达明显下降(P<0.05),Col2α1 mRNA、Acan mRNA的表达升高(P<0.05);经0.8 ng·μl-1 TRPV4过表达质粒处理的软骨细胞中Col2α1、Acan mRNA表达情况明显下降(P<0.05),NOS2 mRNA的表达升高(P<0.05),MMP-13、ADAMTS-5mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:抑制TRPV4的表达能下调软骨细胞退变相关基因表达。

• 单位
  上海中医药大学附属曙光医院; 上海中医药大学