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摘要
<正>本研究主要探讨人剪切修复基因XPB(xeroderma pigmentosum B)稳定转染人肝癌细胞HepG2,观察转染后细胞内野生型p53、p21wafl/cipl、c-myc等基因的表达变化以及相应的细胞生物学影响。一、材料与方法 1．细胞株及重组质粒构建：HepG2细胞来自美国模式菌种收集中心,它具有内源性的野生型p53基因,但表达量低。重组质粒是江西医学院附属第二医院分子医学重点实验室构建,通过用聚合酶链反应、酶切及基因测序三重鉴定所构建的克隆。 2．稳定转染：常规细胞培养,传代24h后,重组质粒 pcDNA3．1-XPB、空载质粒pcDNA3．1通过Lipofectamine转染HepG2细胞,按说明书操作,转染48h后用选择培养基(含 G418 800μg／ml)；经有限稀释法筛选4周获得两株稳定表达的细胞株,即稳定转染重组质粒pcDNA3．1-XPB的HepG2细胞(称HepG2-XPB)、稳定转染空载质粒pcDNA3．1的HepG2
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单位江西省分子医学重点实验室; 南昌大学第二附属医院; 南昌市第九医院; 南昌大学医学院
