朱红毛斑蛾实时荧光定量PCR内参基因的筛选

作者：陈炼; 田忠; 王小云; 陈学敏; 陆温; 王小平; 郑霞林^*

来源：环境昆虫学报, 2021, 43(01): 15-24.

• 基因表达
• 表达稳定性
• GeNorm
• NormFinder
• BestKeeper
• RefFinder

筛选朱红毛斑蛾Phauda flammans(Walker)在不同成虫组织、性别及发育阶段处理条件下稳定表达的内参基因,为进一步开展朱红毛斑蛾相关基因的定量研究提供参考。本研究以不同成虫组织(头、胸、腹、足、翅和触角)、不同成虫性别和不同发育阶段(卵、幼虫、蛹和成虫)为实验材料,对10个候选内参基因进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR),并使用GeNorm、NormFinder和BestKeeper软件及RefFinder网站对候选内参基因的表达稳定性进行评价和综合分析。结果表明:在朱红毛斑蛾不同成虫组织基因定量研究中,TUB2>GAPDH>TUB1>AK>EF1α>ACTIN3>TBP>TUB3>ACTIN2>RPL32,建议以TUB2和GAPDH作为内参基因;在不同成虫性别基因定量研究中,TUB1>EF1α>ACTIN3>RPL32>ACTIN2>TUB2>AK>GAPDH>TUB3>TBP,建议以TUB1和EF1α作为内参基因;在不同发育阶段基因定量研究中,ACTIN3>TBP>TUB1>EF1α>TUB3>ACTIN2>GAPDH>RPL32>TUB2>AK,建议以ACTIN3和TBP作为内参基因。基于GeNorm分析,最佳内参基因使用数目为2个。

• 单位
  华中农业大学; 广西大学