血根碱通过核转录因子-κB信号通路减轻脂多糖诱导的仔猪小肠黏膜上皮细胞炎症反应

作者：高欢; 蒋晓旭; 杨玉婷; 冉津铭; 沈丽艳; 蒋恒鑫; 李雪艳; 林秋叶; 蒋庆文; 曹振辉^*; 潘洪彬^*

来源：动物营养学报, 2021, 33(03): 1675-1686.

• 血根碱
• IPEC-J2细胞
• NF-κB信号通路
• 抗炎

本试验旨在研究血根碱(SG)通过核转录因子-κB(NF-κB)信号通路调控仔猪小肠黏膜上皮细胞(IPEC-J2细胞)抗炎作用机制。在探明SG对IPEC-J2细胞促生长作用的适宜浓度和时间以及构建IPEC-J2细胞致炎模型的LPS适宜浓度和时间的基础上,检测对照组(无添加)、致炎模型细胞组(LPS组,5.0μg/mL LPS处理1 h)和适宜浓度SG+LPS致炎模型细胞组(SG+LPS组,5.0μg/mL LPS处理1 h和0.500μg/mL SG处理24 h)细胞中NF-κB信号通路相关基因和蛋白表达及其产物含量。结果表明:1) SG对IPEC-J2细胞促生长作用的适宜浓度和时间分别为0.500μg/mL和24 h,构建IPEC-J2细胞致炎模型LPS的适宜浓度和时间分别为5.0μg/mL和1 h。2)与对照组相比,LPS组白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、核转录因子-κB亚基1 (NF-κB1A)、核转录因子-κB2 (NF-κB2)、肿瘤坏死因子-α诱导蛋白3(TNFAIP3)、核转录因子κB激酶抑制剂ε(IKKε)、核转录因子-κB1(NF-κB1)、RelB mRNA相对表达量均极显著升高(P<0.01);细胞上清液中IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01);细胞总蛋白中核转录因子-κB抑制蛋白α(IκBα)、p65蛋白表达量极显著降低(P<0.01),核蛋白中p65蛋白表达量极显著升高(P<0.01),胞浆蛋白中p65蛋白表达量极显著下降(P <0.01)。3)与LPS组相比,SG+LPS组细胞中IL-6、 IL-8、NF-кB1A、NF-кB2、TNFAIP3、IKKε、NF-кB1 mRNA相对表达量显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01);细胞上清液中IL-6和IL-8含量显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01);细胞总蛋白中IκBα蛋白表达量极显著升高(P<0.01),核蛋白中p65蛋白表达量极显著下降(P<0.01),胞浆蛋白中p65蛋白表达量极显著升高(P<0.01)。由此可见,SG通过抑制NF-κB信号通路相关基因的活化和p65核转移,减轻IPEC-J2细胞的炎症反应。

• 单位
  云南农业大学; 达州职业技术学院