ApoE亚型蛋白对神经元轴突生长的影响

作者：张洪荣; 程崇杰; 蒋理; 曹芳; 黄志坚; 孙晓川

来源：第三军医大学学报, 2014, 36(15): 1562-1566.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2014.15.025

• 神经元
• 轴突
• 载脂蛋白E
• 微管蛋白
• 细胞分裂周期蛋白

目的观察不同亚型ApoE蛋白(apolipoprotein E,ApoE)对神经元轴突生长的影响,探讨其可能机制。方法取新生C57野生鼠和APOE基因敲除鼠大脑皮质,进行神经元原代培养;在培养第1天,在APOE基因敲除鼠神经元培养基中加入重组人类ApoE2、3、4蛋白,将所培养细胞分为ApoE(-)组、ApoE2组、ApoE3组、ApoE4组和野生组5组。倒置相差显微镜观察神经元生长情况,测量其轴突长度和突起数量。免疫荧光对神经元轴突进行染色,并对神经元轴突荧光强度进行测定;Western blot检测不同亚型ApoE对细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle42,cdc42)表达的影响。结果培养第1、3、5天,野生组、ApoE2组、ApoE3组神经元平均轴突长度较ApoE(-)组及ApoE4组长(P<0.05);培养第5天,ApoE(-)组、ApoE4组神经元突起数量分别为(1.80±0.45)个和(1.90±0.84)个,较野生组(3.80±0.84)个、ApoE2组(3.60±0.55)个、ApoE3组(3.40±1.14)个少(P<0.05);野生组、ApoE2组、ApoE3组神经元轴突荧光强度分别为(54.10±7.32)、(52.40±6.33)、(50.50±8.21),较ApoE(-)组(37.20±9.30)和ApoE4组(39.00±8.32)强(P<0.05);野生组、ApoE2组、ApoE3组cdc42蛋白表达高于ApoE(-)组、ApoE4组(P<0.05)。而在所有实验结果中野生组、ApoE2组与ApoE3组组间以及ApoE(-)组与ApoE4组组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论不同亚型ApoE蛋白对神经元轴突生长的影响不同,对tubulinⅢ及cdc42表达的影响也各不相同,后者可能是其影响神经元轴突生长的机制之一。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院