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摘要
目的动态观察重型颅脑损伤(sTBI)急性期大鼠神经功能缺损评分(NSS)、Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路、脑源性神经营养因子(BDNF)与神经生长因子(NGF)的表达规律, 探讨活血化瘀方剂的干预作用。方法将126只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组(生理盐水2 kg/L)、模型组(生理盐水2 kg/L)、脑蛋白水解物组(BP组, 5.6 g/kg)、桃红四物汤组(TH组, 10.2 g/kg)、血府逐瘀汤组(XF组, 15.6 g/kg)、通窍活血汤组(TQ组, 9.6 g/kg)、补阳还五汤组(BY组, 28.7 g/kg)7组, 每组18只。采用改良Feeney自由落体法建立sTBI大鼠模型;对照组不予创伤处理。各组分别于伤后6 h灌胃相应药物, 伤后1、3、7 d进行NSS评分;取大鼠海马组织, 采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Wnt3a和β-catenin的mRNA表达;采用免疫组化法检测BDNF和NGF的阳性表达。结果与对照组比较, 模型组大鼠伤后1 d即出现明显的颅脑损伤症状, 表现为NSS评分明显升高, Wnt3a和β-catenin的mRNA表达明显上调, BDNF和NGF阳性表达明显增加, 说明sTBI大鼠模型制备成功, 并随时间延长呈现一定自我修复能力。与模型组相比, XF组、TQ组和BY组NSS评分于伤后1 d即明显下降(分:6.6±1.5、6.1±2.0、5.7±2.4比9.4±1.5, 均P<0.05), 而BP组及TH组NSS评分于伤后7 d才明显下降, 且TQ组和BY组NSS评分下降幅度较其他药物组更加显著。与模型组比较, BP组海马组织Wnt3a和β-catenin的mRNA表达分别于伤后1 d、3 d明显升高, 并随时间延长持续升高;4个活血化瘀方剂组Wnt3a和β-catenin的mRNA表达于伤后1～3 d均有不同程度的波动, 但均于伤后7 d明显高于模型组, 以BY组升高更为显著〔Wnt3a mRNA(2-ΔΔCt):154.7±4.1比17.4±1.0, β-catenin mRNA(2-ΔΔCt):17.05±0.45比2.74±0.13, 均P<0.05〕, 其次为TQ组〔Wnt3a mRNA(2-ΔΔCt):126.6±2.8比17.4±1.0, β-catenin mRNA(2-ΔΔCt):8.70±1.19比2.74±0.13, 均P<0.05〕。与模型组比较, BP组BDNF和NGF的阳性表达在伤后1 d升高, 但3 d达峰值后有所下降;4个活血化瘀方剂组BDNF和NGF的阳性表达于伤后1～3 d均有不同程度的波动, 但均于伤后7 d明显高于模型组, 其中TQ组和BY组在伤后1 d即明显高于模型组〔BDNF阳性细胞(个/MP):56.4±6.2、61.6±7.0比37.4±2.0, NGF阳性细胞(个/MP):58.4±5.0、62.4±4.4比53.4±3.6, 均P<0.05〕, 且伤后7 d时升高幅度较其他药物组更为显著。结论桃红四物汤、血府逐瘀汤、通窍活血汤和补阳还五汤对sTBI急性期大鼠的神经再生修复均有一定疗效, 但作用强度有所不同, 以补阳还五汤和通窍活血汤起效更快、效果更好。
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单位上林县人民医院; 广西医科大学第一附属医院
