摘要
目的探讨芍药苷(paeoniflorin,PF)干预高糖环境施万细胞(Schwann cell,SCs)外泌体(exosomes,EXOs)对背根神经节神经元(dorsal root ganglion neurons,DRGn)细胞凋亡的影响。方法取高糖环境SCs,培养24h,透射电镜观察EXOs的形态,蛋白印迹法(Western blot)鉴定EXOs特异性标志蛋白和氧化应激的蛋白表达;将SCs来源的EXOs与DRGn共培养24h,激光共聚焦显微镜观察DRGn摄取SCs来源EXOs的情况,Western blot法检测DRGn中影响细胞凋亡蛋白的表达水平。结果 EXOs形态为双层膜囊泡结构,直径在40~100nm; EXOs中标记蛋白CD63表达证实了EXOs特异性; EXOs中氧化应激蛋白表达升高,尤其是PF干预SCs来源EXOs中Nrf2、HO-1的表达升高更明显; SCs来源EXOs被DRGn摄取,分布于DRGn细胞核周围;经PF干预SCs来源EXOs影响DRGn促凋亡蛋白GADD153和Bax表达显著降低,抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显增加。结论 PF通过SCs EXOs携带氧化应激信息,影响DRGn中促凋亡蛋白表达减少,抗凋亡蛋白表达增加,从而减轻DRGn细胞凋亡,有利于改善糖尿病周围神经病变。
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单位医药学院; 首都医科大学