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摘要
目的 探究羊踯躅含药血清对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)诱导的类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞（rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes, RA-FLS）增殖和炎症因子分泌的影响和作用机制，为临床治疗RA提供理论及实验依据。方法 将细胞分为空白组、模型组、雷公藤多苷组、5%和10%空白血清组及5%和10%羊踯躅含药血清组。RA-FLS经TNF-α(10 ng/mL)处理24 h以构建RA细胞模型。CCK-8检测细胞增殖情况。采用ELISA检测炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1 beta, IL-1β)、白细胞介素-17A(interleukin-17A, IL-17A)、白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)、白细胞介素-2(interleukin-2, IL-2)和γ干扰素（interferon-γ, IFN-γ）的含量。Western blot检测蛋白激酶B(protein kinase B, AKT1)、磷酸化AKT1(phosphorylated AKT1, p-AKT1)、原癌基因c-JUN、p-c-JUN、p65、p-p65、表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）蛋白表达水平。结果 与未用羊踯躅含药血清处理的正常RA-FLS相比，用5%和10%羊踯躅含药血清处理的细胞增殖活性在48 h内没有明显的变化（P>0.05），而用20%和30%羊踯躅含药血清处理的细胞增殖活性明显降低（P<0.05）。与空白组相比，模型组的细胞增殖活性显著上升（P<0.05）；与5%和10%空白血清组相比，5%和10%羊踯躅含药血清组的细胞增殖活性均显著降低（P<0.05）。与空白组相比，模型组的IL-1β、IL-17A、IL-6、IL-2和IFN-γ水平均明显升高（P<0.05）；与5%和10%空白血清组相比，5%和10%羊踯躅含药血清组的IL-1β、IL-17A、IL-6、IL-2和IFN-γ水平明显下降（P<0.05）。与空白组相比，模型组的EGFR表达量以及AKT1、c-JUN和p65的磷酸化水平均明显升高（P<0.05）；与5%和10%空白血清组相比，5%和10%羊踯躅含药血清组的EGFR表达量以及AKT1、c-JUN和p65的磷酸化水平显著降低（P<0.05）。此外，10%羊踯躅含药血清的效果比5%羊踯躅含药血清更为显著（P<0.05）。结论 羊踯躅含药血清能抑制TNF-α诱导的RA-FLS增殖及促炎因子的分泌，其机制可能与调控EGFR、核因子-κB(nuclear factor-κB, NF-κB)、AKT和c-Jun N末端激酶（c-Jun N-terminal kinase, JNK）通路有关。
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