鸭坦布苏病毒E蛋白膜外区的原核表达与鉴定

作者：刘宗梁; 付钰广; 吉艳红; 李郁; 魏建忠; 朱启运

来源：中国兽医科学, 2013, (08): 850-854.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2013.08.009

• 鸭坦布苏病毒
• E蛋白膜外区
• 原核表达
• 鉴定 duck Tembusu virus
• E gene
• prokaryotic expression
• identification

为获得鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)E蛋白膜外区的表达产物,以DTMUV安徽分离株(AH10)E基因序列设计特异性引物,扩增E基因,将其克隆至原核表达载体pET-SUMO中,构建重组表达质粒pET-SUMO-E,然后将其转化至感受态细胞E.coli Rosetta(DE3)中,并以IPTG诱导表达。经SDS-PAGE检测,获得了70ku的表达产物,与预期结果相符。Western-blot分析表明,目的蛋白能与兔抗DTMUV E蛋白多克隆血清及DTMUV鸭阳性血清发生特异性反应,显示出良好的反应活性。结果表明,成功表达了E蛋白膜外区,这一成果为DTMUV疫苗制备...

• 单位
  安徽农业大学; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 动物科技学院; 中国农业科学院兰州兽医研究所