siRNA介导的捻转血矛线虫Hc38基因沉默条件的优化

作者：何延华; 陈南颖; 王新华; 薄新文; 韩猛立

来源：中国兽医学报, 2013, (10): 1542-1547.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2013.10.015

• siRNA
• RNA干扰
• 捻转血矛线虫
• Hc38基因 siRNA
• RNA interference
• Haemonchus contortus
• Hc38 gene

将体外孵育的L3期幼虫分别在无血清和添加5%血清的生理盐水、PBS、EBSS(Earles balanced salt solution)中浸泡培养72h,根据L3期幼虫的生存状态确定最佳浸泡条件;然后分别用2.5%和5%的Lipofectamine 2000进行转染,根据转染效果确定转染试剂最佳浓度;最后分别用终浓度30,60,90,120nmol/L的siRNA浸泡24,48,72h,real-time PCR检测干扰效果,确定siRNA最佳浓度。结果表明,L3期幼虫在添加5%血清的EBSS中生存状态最好,采用5%的Lipofectamine 2000进行转染可以得到85%的转染效率,而...

• 单位
  新疆生产建设兵团; 新疆农垦科学院; 石河子大学