摘要
目的 :探索中药提取物大蒜素对人胆囊癌NOZ细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响,以及可能的作用机制。方法 :用不同浓度的大蒜素处理NOZ细胞后,采用CCK-8法和平板克隆形成实验检测NOZ细胞的活性和增殖能力;异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的AnnexinⅤ(AnnexinⅤ-FITC)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染FCM法和Hoechst 33342染色法检测NOZ细胞凋亡情况;FCM法检测NOZ细胞周期分布的变化;Transwell小室实验检测NOZ细胞侵袭能力。采用蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白剪切型-聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(cleaved-polyadenosine diphosphate ribose polymerase,cleaved-PARP)、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9、Bcl-2、Bax、细胞周期相关蛋白周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependentkinase1,CDK1)、细胞周期蛋白B1(cyclinB1)、侵袭相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)表达的变化。结果 :与对照组相比,大蒜素终质量浓度为40、80和120μg/m L时均可以抑制NOZ细胞的活性和增殖能力(P均<0.05)。大蒜素可有效促进NOZ细胞发生凋亡(P <0.05),并且将细胞周期阻滞于G2/M期(P <0.001),还可有效抑制NOZ细胞的侵袭能力(P <0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示,大蒜素可上调NOZ细胞中促凋亡蛋白cleaved-PARP、cleavedcaspase3、cleaved-caspase9和Bax的表达水平(P均<0.001),下调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达水平;下调细胞周期相关蛋白CDK1和cyclin B1的表达水平(P均<0.05);上调侵袭蛋白E-cadherin的表达,下调N-cadherin和vimentin的表达(P均<0.001)。结论 :大蒜素能够抑制人胆囊癌NOZ细胞的增殖和侵袭能力,并且诱导其发生凋亡。
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单位包头医学院