人类新基因flj20174的克隆、亚细胞定位、表达谱及功能初探

作者：刘朝晖; 曹**; 陈留存; 杨光; 李少华; 高亚萍; 丁红梅; 范明; 沈倍奋; 邵宁生

来源：军事医学科学院院刊, 2006, (05): 410-414.

• flj20174
• 基因表达
• 亚细胞定位
• 细胞凋亡

目的:研究人类系统性RNA i相关基因flj20174的克隆表达、亚细胞定位和表达谱,以及功能的初步探索。方法:利用生物信息学方法分析、预测flj20174基因的表达谱和功能;采用RT-PCR技术,从健康人外周血单个核细胞cDNA中,扩增获得flj20174可能的全长编码区,并将其亚克隆于pEGFP-N1载体;利用Northern杂交鉴定其转录本;利用半定量PCR确定flj20174在免疫组织和免疫细胞中的表达谱;通过脂质体转染入HeLa细胞,观察融合蛋白的亚细胞定位和过表达对细胞状态的影响。结果与结论:获得了2 484 bp的全长编码区,测序后发现与NCB I公布的Ak00018的序列完全一致;Northern杂交证实其转录本约为4 669 bp;证实该基因属于低丰度基因,在免疫细胞中有相对较高的表达,并在B细胞和T细胞激活后表达量下降;与EGFP融合表达后可见该蛋白主要分布于内膜系统,而且过表达该融合蛋白可以引起细胞的死亡,推测此过程可能与机体的免疫防御相关。

• 单位
  军事医学科学院基础医学研究所