三氧化二砷体外诱导人HepG2细胞铁蛋白基因表达的研究

作者：吴顺华郑玉建成军张跃新刘妍刘开泰

来源：解放军医学杂志, 2005, (07): 596-598.

• 三氧化二砷
• HepG2细胞
• 铁蛋白
• 抑制性消减杂交 arsenic trioxide
• human HepG2 cell line
• ferritin
• suppression constructive hybridization

目的了解低剂量三氧化二砷诱导的HepG2细胞的差异表达基因,揭示慢性砷中毒对肝细胞损伤的作用机制。方法在体外用三氧化二砷(5μmol/L)处理HepG2细胞,同时以PBS处理的相同细胞系作为对照;24h后制备细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经RsaⅠ酶切后,将实验组cDNA分成2组,分别与2种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行2次消减杂交及2次抑制性聚合酶链反应(PCR),将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌JM109进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析。结果成功构建三氧化二砷处理HepG2细胞差异表达基因的cDNA消减文库。文库扩...

• 单位
  北京地坛医院; 新疆医科大学; 解放军第302医院