肿瘤抗原负载树突状细胞联合CIK通过促进ASK1活化增强对人食管癌细胞的杀伤活性

作者：段铮; 李洪霖; 胡斌; 李云; 黄莉^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2023, 39(06): 501-508.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009583

• 食管癌
• 肿瘤抗原
• 树突状细胞
• 细胞因子诱导的杀伤细胞
• 杀伤作用

目的 探究肿瘤抗原负载的树突状细胞(Ag-DC)联合细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对食管癌肿瘤细胞杀伤的影响及作用机制。方法 诱导培养外周血DC和CIK,用Ag负载DC获得Ag-DC,将Ag-DC与CIK共培养。实验分为CIK组、 DC联合CIK组、 Ag-DC联合CIK组。流式细胞术检测细胞表型，噻唑蓝(MTT)法测定细胞对EC9706食管癌细胞的杀伤活性，异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(annexin V-FITC/PI)双染法检测细胞凋亡率，免疫荧光染色检测磷酸化的细胞凋亡信号调节激酶1(p-ASK1)表达，Western blot法测定ASK1途径相关蛋白水平。构建食管癌移植瘤裸鼠模型，分为对照组、 DC联合CIK组和Ag-DC联合CIK组。通过尾静脉注射对应免疫细胞进行治疗，每隔2 d测量一次肿瘤体积。21 d后处死所有裸鼠，取出瘤体，HE染色观察肿瘤组织病变情况，免疫组织化学染色法检测抗原KI-67(ki67)及ASK1表达。结果 与单独CIK组和DC联合CIK组相比，Ag-DC与CIK共培养后，细胞中CD3+ CD8+与CD3+ CD56+的比例明显升高，对EC9706细胞的杀伤率明显增加，增加EC9706细胞凋亡，并促进ASK1的活化水平；与单独CIK组和DC联合CIK组比较，Ag-DC联合CIK处理的裸鼠移植瘤生长受到明显的抑制，21 d后观察到该组肿瘤组织块较小，肿瘤组织内细胞排列较为稀疏，肿瘤组织内ki67阳性率明显减少，而ASK1阳性率则明显增高。结论 Ag-DC与CIK共培养后，能够明显提高对食管癌肿瘤细胞的杀伤活性，该作用机制可能与ASK1途径的激活相关。

• 单位
  河南省中医院