淫羊藿苷联合碱性成纤维细胞生长因子促进外周血间充质干细胞自我更新

作者：王鹏珍; 孟庆奇; 陈松生; 张少衡^*

来源：中国生物化学与分子生物学报, 2021, 37(12): 1667-1674.

DOI：10.13865/j.cnki.cjbmb.2021.10.1338

• 外周血间充质干细胞
• 淫羊藿苷
• 碱性成纤维细胞生长因子
• 衰老

研究淫羊藿苷(icariin, ICA)联合碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)对大鼠外周血间充质干细胞(rat peripheral blood mesenchymal stem cells, rPBMSCs)增殖、衰老及自我更新的影响。分离、培养并鉴定rPBMSCs;取第3代rPBMSCs用于后续研究。实验分为4组:对照组;ICA组;bFGF(20 ng/mL bFGF)组;联合(ICA和bFGF)组。CCK-8检测结果表明,ICA在浓度为10-6 mol/L时,显著促进rPBMSCs增殖,并将该浓度用于后续试验。采用CCK-8法测定各组rPBMSCs吸光度并制作出生长曲线,4组细胞生长曲线均近似"S"形,7 d时,相比于对照组,ICA组、bFGF组和联合组细胞OD值显著增加,差异有统计学意义(P<0.05),相比于ICA组和bFGF组,联合组rPBMSCs OD值进一步显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。β-半乳糖苷酶染色检测结果表明,相比于对照组,ICA组和bFGF组衰老百分比显著降低(P<0.05),相比于ICA组和bFGF组,联合组rPBMSCs衰老百分比显著下降(P<0.05)。多潜能分化检测结果证明,ICA联合bFGF明显提高rPBMSCs体外诱导成软骨、成骨和成脂的能力。Western印迹检测结果显示,ICA和bFGF单独作用均能促进PCNA、Nanog和Oct4蛋白质表达(P<0.05),抑制p16、p21和p53蛋白质表达(P<0.05),而ICA和bFGF联合作用效果更显著(P<0.05)。综上所述,ICA联合bFGF通过促进rPBMSCs增殖,维持干性,延缓衰老维持自我更新。

• 单位
  广州市创伤外科研究所; 暨南大学附属广州红十字会医院