新生牛血清的质量控制对SPF鸡胚细胞和人二倍体(2BS)细胞生长的影响

作者：付永其; 金珏艳; 张颖欣; 刘辉; 陆晨; 宋艳梅; 杨琦; 陆梦溪; 王为^*

来源：中国生物制品学杂志, 2018, 31(11): 1182-1191.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.002354

• 新生牛血清
• 质量控制
• SPF鸡胚细胞
• 人二倍体(2BS)细胞
• 细胞存活率
• 病毒滴度

目的考察新生牛血清质量控制对SPF鸡胚细胞和人二倍体(2BS)细胞生长的影响。方法选择来源可追溯性、工艺质量稳定,且检定合格的新生牛血清样品配制细胞生长液,用于SPF鸡胚细胞和2BS细胞的培养。待细胞生长成致密成纤维单层细胞,记录细胞成单层的时间,用胰酶消化细胞,通过全自动细胞计数仪对细胞悬液进行测定,观察总细胞数、活细胞数,计算细胞存活率。根据活细胞数计算MOI,分别用腮腺炎及风疹病毒接种SPF鸡胚细胞和2BS细胞,检测收获病毒液的滴度。结果SPF鸡胚细胞总细胞数不低于3.5×106个/mL,活细胞数不低于2.1×106个/mL,细胞存活率不低于60%;2BS细胞总细胞数不低于7.0×105个/mL,活细胞数不低于4.2×105个/mL,细胞存活率不低于60%。腮腺炎病毒原液滴度在6.1～6.6 lgCCID50/mL之间,平均值为6.28 lgCCID50/mL,SD为0.11,生产过程加工能力指数(process capability index,Cpk)为1.51,批间质量趋于一致;风疹病毒原液滴度均在5.5～6.2 lgCCID50/mL之间,平均值为5.8 lgCCID50/mL,SD为0.17,Cpk值为1.40,批间质量趋于一致。结论新生牛血清的质量良好,用其培养SPF鸡胚细胞和2BS细胞的活细胞比率可控,收获的病毒液滴度较均一,差异性较小。

• 单位
  北京北生研生物制品有限公司