Clostridium butyricum蔗糖磷酸化酶的酶学性质及其功能研究

作者：谭姚姚; 何贺贺; 王宏萌; 梁蒙; 林宇; 黄日波; 杜丽琴^*

来源：广西科学, 2022, 29(06): 1094-1102.

DOI：10.13656/j.cnki.gxkx.20230110.009

• 蔗糖磷酸化酶
• 丁酸梭菌
• 克隆表达
• 纯化
• 酶学性质
• 转糖苷功能

本研究克隆表达丁酸梭菌Clostridium butyricum DSM10702菌株的蔗糖磷酸化酶基因，并探究重组酶的酶学性质和转糖苷功能。从丁酸梭菌C.butyricum DSM10702菌株中克隆蔗糖磷酸化酶基因cbsp,构建重组表达质粒pQE30-cbsp并在大肠杆菌Escherichia coli XL1-blue中诱导表达；将重组蛋白经镍柱纯化后，进行酶学性质和转糖苷功能研究。实验结果表明，以蔗糖为底物，重组酶Cbsp的最适温度为45℃、最适pH为7.0、Vmax和Km分别为(957±23.29)μmol·mg-1·min-1和(62.4±4.749) mmol·L-1。当以葡萄糖-1-磷酸(G-1-P)为糖基供体时，重组酶Cbsp对于多数单糖、糖醇类、(-)-儿茶素、己基-β-D-吡喃葡萄糖苷和L-抗坏血酸表现出转糖苷活性。以上研究结果可丰富蔗糖磷酸化酶相关数据库，为其应用研究提供参考。

• 单位
  亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室