九香虫水提液通过miR-1287-5p/泛素特异性肽酶22通路调控非小细胞肺癌增殖、侵袭和迁移的分子机制

作者：吴希; 赖晓丹; 莫剑妹

来源：药物生物技术, 2020, 27(06): 506-512.

DOI：10.19526/j.cnki.1005-8915.20200603

• 九香虫水提取液
• miR-1287-5p
• USP22
• 非小细胞肺癌
• 增殖
• 迁移
• 侵袭

将九香虫水提液用于非小细胞肺癌的治疗,探讨九香虫水提液对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的调控机制。用九香虫水提取液(44、66、99 mg/L)处理A549细胞,筛选最适浓度99 mg/L。用脂质体法将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-1287-5p组(转染miR-1287-5p mimics)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、antimiR-1287-5p组(转染anti-miR-1287-5p)、Jiuxiang aqueous extract+anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC用99 mg/L九香虫水提取液处理)、Jiuxiang aqueous extract+anti-miR-1287-5p组(转染anti-miR-1287-5p用99 mg/L九香虫水提取液处理)转染至A549细胞;噻唑蓝(MTT)法、迁移实验(Transwell)小室、免疫印迹(Western blot)实验、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞的抑制率、迁移侵袭、细胞周期蛋白依赖激酶(Cyclin D1)、细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21)、基质金属蛋白酶(MMP) 2、MMP-9、干扰泛素特异肽酶(USP22)、miR-1287-5p的表达;双荧光素酶报告基因实验检测细胞的荧光活性。九香虫水提取液呈浓度依赖性显著提高A549细胞的抑制率,抑制细胞的迁移和侵袭,下调Cyclin D1、MMP-2、MMP-9,上调p21(P<0.05)。九香虫水提取液呈浓度依赖性显著上调miR-1287-5p的表达,下调USP22表达,并且过表达miR-1287-5p能够抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,下调Cyclin D1、MMP-2、MMP-9,上调p21,而抑制miR-1287-5p可逆转九香虫水提取液对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用,并上调Cyclin D1、MMP-2、MMP-9,下调p21。此外,miR-1287-5p明显的抑制野生型USP22的A549细胞荧光活性。九香虫水提取液可抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制与上调miR-1287-5p进而靶向抑制USP22相关,可为九香虫水提取液治疗非小细胞肺癌提供支持。

• 单位
  深圳市龙华区人民医院