基于发根农杆菌的大豆CRISPR/Cas9系统靶点可行性的快速检测方法

作者：罗可; 王珞; 刘辉^*

来源：农业灾害研究, 2023, 13(07): 56-58.

• CRISPR/Cas9
• 大豆
• 发根农杆菌
• 基因编辑

研究选取大豆FAD2-1A和FAD2-1B基因为靶标，使用CRISPR/Cas9基因编辑系统构建靶点的基因敲除载体，并利用发根农杆菌K599的特性侵染大豆植株，以获取不定根，通过对不定根的DNA提取和PCR测序鉴定，发现靶点前的序列峰图平稳且准确，在靶点处开始出现杂乱的套峰，表明大豆FAD2-1A与FAD2-1B2个基因均被成功编辑。此方法操作简单、实验周期较短，实现了对大豆中选择靶点的可行性的快速鉴定，为研究大豆的FAD2基因功能和遗传改良方面提供了新的技术支持。

• 单位
  贵州省农业科学院