Alpl基因影响骨髓间充质干细胞治疗溃疡性结肠炎

作者：张立书; 刘安琪; 何小宁; 金岩; 李蓓; 金钫

来源：中国组织工程研究, 2021, 25(25): 3970-3975.

• 干细胞
• 骨髓间充质干细胞
• 溃疡性结肠炎
• 基因敲除
• 碱性磷酸酶
• 治疗
• 小鼠

背景:骨髓间充质干细胞移植治疗溃疡性结肠炎已取得显著疗效,但是其具体作用机制尚未完全阐明。目的:观察并探讨Alpl基因对骨髓间充质干细胞治疗溃疡性结肠炎的影响。方法:①饲养并繁殖Alpl~(+/-)小鼠与野生型小鼠,进行基因型鉴定;②体外培养Alpl~(+/-)小鼠和野生型小鼠的骨髓间充质干细胞,观察细胞生长情况,成骨分化实验和流式细胞仪检测细胞表面标记物进行干细胞鉴定;③将24只C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型对照组、野生型小鼠骨髓间充质干细胞治疗组、Alpl~(+/-)小鼠骨髓间充质干细胞治疗组,后3组给予3%葡聚糖硫酸钠水溶液饲喂7 d诱导小鼠溃疡性结肠炎模型,2个治疗组小鼠在喂葡聚糖硫酸钠溶液第3天和第5天时分别尾静脉注射野生型小鼠或Alpl~(+/-)小鼠来源的骨髓间充质干细胞,第10天处死取结肠组织;④记录每日体质量变化并计算疾病活动指数,比较结肠长度,苏木精-伊红染色观察比较结肠黏膜的组织学变化。结果与结论:①基因型鉴定结果示杂合子为双条带,与美国杰克逊实验室提供的预测结果一致,提示成功繁育Alpl~(+/-)小鼠;②两组细胞均能形成红棕色的成骨结节,且均表达间充质干细胞表面标记物CD146和CD73,但相较于野生型来源骨髓间充质干细胞,Alpl~(+/-)小鼠来源骨髓间充质干细胞形态多样,缺乏边界清晰的长梭形细胞;③与模型对照组小鼠相比,2个治疗组小鼠肠炎症状和病理变化均减轻,但野生型小鼠骨髓间充质干细胞组的治疗效果明显优于Alpl~(+/-)小鼠骨髓间充质干细胞组;④结果提示,骨髓间充质干细胞移植能够治疗葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎,且Alpl基因半敲除抑制骨髓间充质干细胞对溃疡性结肠炎的治疗效果。

• 单位
  第四军医大学; 军事口腔医学国家重点实验室