基于重组酶聚合酶扩增技术的玉米矮花叶病毒快速检测方法的建立

作者：赵振兴; 范奇璇; 冯黎霞; 李献锋; 张永江^*

来源：植物保护, 2022, 48(06): 83-89.

DOI：10.16688/j.zwbh.2022434

• 玉米矮花叶病毒
• 重组酶聚合酶扩增
• 检测

玉米Zea mays L.是重要的粮饲兼用作物。重要检疫性病毒玉米矮花叶病毒maize dwarf mosaic virus(MDMV)一直威胁玉米生产，为预防外来有害生物入侵，本研究以玉米可能携带的MDMV为目标，根据MDMV外壳蛋白(coat protein, CP)保守基因序列，基于重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification, RPA),设计了3对RPA引物，筛选并优化了反应体系，建立了MDMV的快速检测方法，最终的RPA反应体系中引物终浓度为0.4μmol/L,反应温度为42℃,反应时间为20 min。该方法可特异性检测MDMV,对MDMV CP阳性质粒样品的检测灵敏度可以达到105拷贝/μL(≈369 fg/μL),高于RT-PCR的检测灵敏度。该方法具有快速准确等优点，可用于玉米种子或植株中携带MDMV的检测。

• 单位
  广州海关技术中心; 中国农业大学; 中国检验检疫科学研究院