新城疫病毒F_(48)E_9株和La Sota株F基因在Bac-to-Bac昆虫杆状病毒系统中的表达

作者：袁萍; 闫丽辉; 冉多良; 刘培欣; 闻晓波; 曹殿军

来源：新疆农业大学学报, 2006, (02): 5-8.

• 新城疫病毒
• F基因
• 重组杆状病毒
• 蛋白表达 newcastle disease virus
• F gene
• recombinant baculovirus
• protein expression

将新城疫病毒(F48E9株和La Sota株)F基因插入至杆状病毒转移载体pFastBacTMHT A中,分别构建重组质粒pFastBacHT-F48F,pFastBacHT-LaF,然后转化E.coliDH5α,以LB/AMP±平板筛选阳性重组子并测序。测序正确后转化至E.coliDH10Bac感受态细胞中,经抗性培养和蓝白斑筛选,筛选出白色菌落后,提取重组Bacmids(分别命名为rBacmid-F48F和rBacmid-LaF),经PCR鉴定正确后,将阳性重组Bacmids转染Sf9昆虫细胞。在昆虫细胞内,重组Bacmid经复制,表达,装配,形成重组杆状病毒,经SDS-PAGE和West...

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 新疆农业大学