胡椒4-香豆酸：辅酶A连接酶Pn4CL基因的克隆及表达分析

作者：范睿; 胡丽松; 伍宝朵; 郝朝运^*

来源：热带作物学报, 2020, 41(04): 737-744.

DOI：10.3969/j.issn.1000-2561.2020.04.015

• 胡椒
• 4-香豆酸:辅酶A连接酶
• 克隆与表达

根据胡椒4-香豆酸:辅酶A连接酶(4-coumarate:coenzyme A ligase,4CL)基因的部分序列设计引物,运用RACE方法获得其家族成员的1个全长c DNA,命名为Pn4cl,长度2130 bp,开放阅读框1638 bp,编码545个氨基酸。预测Pn4CL分子量为59.57 k Da,理论等电点为5.70。该基因含有AMP-binding(AMP-binding enzyme)、Cai C[Acyl-Co A synthetase (AMP-forming)/AMP-acid ligaseⅡ]、PLN02246、AFD-class Ⅰ等结合域,具有植物4CL所共有的保守结构域。系统进化分析表明,Pn4CL与北细辛的同源性最高,同时与木兰分支类植物的4CL聚类在一起,与菊分支的进化距离较近,与蔷薇分支的进化距离较远。亚细胞定位表明,该蛋白定位在细胞膜上。Real-timeRT-PCR结果表明,该基因受外援激素SA和MeJA诱导表达,同时接种辣椒疫霉菌后,Pn4CL基因的表达量在抗/感2种胡椒中均出现先增加后减少的现象,并且在抗病种质中表达量较高。研究结果为Pn4CL的功能研究提供了理论依据。

• 单位
  中国热带农业科学院香料饮料研究所