摘要

目的探究敲低WD重复结构域12(WDR12)对小鼠精原细胞(GC-1)的影响。方法利用脂质体转染法将针对WDR12的shR NA编码克隆(shW DR12)及阴性对照的EGFP质粒转染细胞后,Western blot和Q-PCR检测细胞中WDR12表达量; CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况; TUNEL试剂盒染色检测细胞凋亡情况; Q-PCR检测细胞中核糖体蛋白基因的差异表达。结果与转染阴性对照质粒的细胞相比,转染shW DR12的细胞检测结果显示成功降低了GC-1细胞中WDR12的表达(P <0.01); WDR12敲低的GC-1细胞增殖被抑制; TUNEL染色结果显示WDR12敲低后凋亡细胞数量增多;转染shW DR12后细胞内核糖体相关蛋白基因[核糖体蛋白S3(RPS3)(P <0.05)、核糖体蛋白L11 (RPL11)(P <0.01)、核糖体蛋白S15(RPS15)(P <0.05)以及核糖体蛋白L31(RPL31)(P> 0.05)]的表达量下降。结论转染shW DR12能有效敲低GC-1细胞中WDR12的表达,WDR12表达的降低导致GC-1细胞出现增殖能力下降、凋亡数量增多及核糖体相关蛋白基因表达下调。

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