摘要
目的探讨小鼠肺发育过程中2型固有淋巴细胞(ILC2)、M1和M2型巨噬细胞(AMs)在肺组织中的动态改变及与肺发育的关系。方法新生C57BL/6小鼠于出生后1、3、7、14和21 d随机取15只处死后取肺组织,流式细胞术检测肺组织ILC2、M1及M2型巨噬细胞数量,酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肺组织IL-33、IL-13及IL-4表达,流式细胞术和Western blot分别检测体外IL-33干预巨噬细胞RAW264.7后表型变化与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶-1(Arg-1)蛋白水平表达。结果小鼠出生后肺组织中ILC2数量先升后降,在14 d达到峰值;M1型巨噬细胞数量于3 d内升高,以后降低,M2型巨噬细胞先升后降,14 d达高峰;IL-33于出生后14 d内高水平表达,21 d出现降低;IL-13和IL-4表达水平均先升后降,14 d达到峰值;尽管IL-13+ILC2/IL-13+和IL-4+ILC2/IL-4+百分比均在21 d内逐渐增加,但IL-13+ILC2和IL-4+ILC2数量均呈先升后降趋势,峰值出现在14 d;体外IL-33干预RAW264.7表型无明显变化,iNOS和Arg-1蛋白水平无明显变化。结论在新生小鼠肺发育过程中,ILC2峰值落在快速肺泡化期末;M2型巨噬细胞在肺泡化期占主导地位;体外IL-33直接刺激巨噬细胞无明显作用。
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单位江苏大学附属医院; 江苏大学