二甲双胍对糖基化终末产物诱导牙周膜成纤维细胞凋亡及p38 MAPK/NF-κB通路的影响

作者：黄辉; ***; 黄炫赓; 罗智杰

来源：山东医药, 2021, 61(14): 19-23.

• 二甲双胍
• 晚期糖基化终末产物
• 牙周膜成纤维细胞
• p38丝裂原活化蛋白激酶/核因子κB通路
• 细胞增殖
• 细胞凋亡
• 氧化应激

目的探讨二甲双胍对晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导牙周膜成纤维细胞(PDLCs)凋亡及p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/核因子κB(NF-κB)通路的影响。方法体外培养人PDLCs细胞,分别加入0、100、200、300μg/mL的AGEs培养24、48、72 h,采用CCK-8法检测不同浓度、不同时间点的细胞增殖情况,筛选AGEs的最佳作用浓度和作用时间,分别为300μg/mL和48 h。收集细胞,设对照组、AGEs组及2、4、8 mmol/L二甲双胍组,对照组仅加入培养基,AGEs组加入终浓度为300μg/mL的AGEs,2、4、8 mmol/L二甲双胍组加入终浓度为300μg/mL的AGEs及终浓度分别为2、4、8 mmol/L的二甲双胍,培养48 h。采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,ELISA法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)以及细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,Western blotting法检测细胞p38 MAPK/NF-κB通路相关蛋白p-p38 MAPK、NF-κB的相对表达量。结果与对照组相比,AGEs组细胞OD值降低,细胞凋亡率升高(P均<0.05);与AGEs组相比,2、4、8 mmol/L二甲双胍组细胞OD值升高,细胞凋亡率降低(P均<0.05),且二甲双胍高浓度组细胞OD值高于、细胞凋亡率低于低浓度组(P均<0.05)。与对照组相比,AGEs组细胞中SOD水平降低,MDA水平升高(P均<0.05);与AGEs组相比,2、4、8 mmol/L二甲双胍组细胞中SOD水平升高,MDA水平降低(P均<0.05),且二甲双胍高浓度组SOD高于、MDA低于低浓度组(P均<0.05)。与对照组相比,AGEs组细胞上清液中IL-6、TNF-α水平升高(P均<0.05);与AGEs组相比,2、4、8 mmol/L二甲双胍组细胞上清液中IL-6、TNF-α水平降低(P均<0.05),且二甲双胍高浓度组IL-6、TNF-α水平低于低浓度组(P均<0.05)。与对照组相比,AGEs组细胞p-p38 MAPK、NF-κB p65蛋白表达升高(P均<0.05);与AGEs组相比,2、4、8 mmol/L二甲双胍组细胞p-p38 MAPK、NF-κB p65蛋白表达降低(P均<0.05),且二甲双胍高浓度组p-p38 MAPK、NF-κB p65蛋白表达低于低浓度组(P均<0.05)。结论二甲双胍对AGEs诱导的氧化应激反应、p38 MAPK/NF-κB通路激活、炎症反应均具有抑制作用,可减少细胞凋亡并促进细胞增殖。

• 单位
  广西医科大学附属口腔医院