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摘要
目的 研究db/db小鼠骨骼肌胰岛素抵抗的发病机制及中药复方益糖康对其的改善作用。方法 9周龄健康雄性SPF级db/db小鼠16只、db/m小鼠8只，分别设置模型组、益糖康组、空白组，益糖康组使用30 g·kg-1·d-1的中医复方益糖康煎剂进行灌胃，其余两组予以等体积的生理盐水灌胃，5周后进行取材，分离各组小鼠的骨骼肌组织。所有样本经TMT 10标试剂进行标记定量、蛋白酶解、TMT肽段标记与肽段分级、LC-MS/MS分析后，用数据库检索方法确定差异蛋白，并进行生信分析。结果 所选取的样本稳定，有较高的科学价值；与db/m正常小鼠相比，db/db小鼠骨骼肌胰岛素抵抗总共导致Amd1、Serpina1e、Sorbs3、Fabp4、Myl3、Upf2等109个蛋白的表达变化，涉及了糖酵解、脂肪酸氧化、ATP的合成及供能等生物过程及PPAR、支链氨基酸代谢等信号通路；中药复方益糖康可以改善db/db小鼠骨骼肌胰岛素抵抗，总共涉及了Pcolce、Pgk2、Trip11、Tmem41b、Mrps9、Bola2等49个蛋白的表达变化，通过调节三羧酸循环，乙醛酸和二羧酸代谢等通路实现；中药复方益糖康可以产生心血管受益，并能缓解由2型糖尿病及胰岛素抵抗导致的帕金森病、亨廷顿病。结论 db/db小鼠是研究2型糖尿病及胰岛素抵抗的理想模型，TMT标记定量蛋白质组学技术可以精准发现相关差异蛋白，结果较权威；脾虚导致的骨骼肌线粒体功能障碍是2型糖尿病及胰岛素抵抗发病的原因之一；中药复方益糖康可以对2型糖尿病及胰岛素抵抗异常的生物过程起到纠正作用，与健脾修复线粒体损伤、促进线粒体自噬有关；整个实验过程筛选的差异蛋白及所涉及的生理病理变化是课题组下一步研究的重点。
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